國內(nèi)色譜柱市場還沒有人進(jìn)行過科學(xué)統(tǒng)計(jì)，連一年色譜柱銷售總量也眾說紛云，更別說國內(nèi)生產(chǎn)色譜柱所占份額了。我估計(jì)是占30%左右吧。

　　11、預(yù)柱或保護(hù)柱用還是不用的問題！原來分析中藥品種時(shí)，我一直都是用保護(hù)柱。但來到新公司后，發(fā)現(xiàn)大家都沒有使用，幾個(gè)實(shí)驗(yàn)室連保護(hù)柱都沒找到一個(gè)，也就是說大家從來都沒有用過。后來問一個(gè)老員工，說是有可能影響藥品分析。想問：安裝保護(hù)柱后會(huì)影響樣品分析嗎？我們做的大多是頭孢類的抗生素。

　　答：應(yīng)該這樣說，加上保護(hù)柱，肯定有利于保護(hù)色譜柱不受一些顆粒物質(zhì)的堵塞，肯定有害于分離度和柱效，因?yàn)楸Ｗo(hù)柱中間有著死體積的存在。但是如果保護(hù)柱接得好，并且盡量控制其匹配性和經(jīng)常更換，分離度和柱效應(yīng)該影響并不大。頭孢類的抗生素也要看到底是原料藥還是制劑嘍，有些原料藥，可以根據(jù)色譜柱的損耗選擇添加預(yù)柱(中間是個(gè)篩板)，制劑的話，如果有輔料嚴(yán)重干擾或者流動(dòng)相鹽分比較大，那還是最好配個(gè)保護(hù)柱。

　　12、用的是四元梯度泵A50%甲醇B50%水經(jīng)常出現(xiàn)停或進(jìn)氣泡這是什么原因？

　　答：水/甲醇比例在55：45時(shí)，黏度和柱壓有個(gè)極大值。50：50接近了這個(gè)極值，柱壓是比較高的，但影響柱壓最大的還是填料粒徑和色譜柱內(nèi)徑，你這個(gè)實(shí)例中不知用的什么規(guī)格的色譜柱？系統(tǒng)壓力高，可能會(huì)因溶劑泵中的過濾頭供液速度跟不上而導(dǎo)致氣泡進(jìn)入系統(tǒng)，停機(jī)也應(yīng)該是因?yàn)闅馀葸M(jìn)入壓力下降的原因，可考慮更換液體通量更大的過濾頭。

　　13、資料顯示：在正常條件下，填料粒度＞20µm時(shí)，干法填充制備柱較為合適；顆粒＜20µm時(shí)，濕法填充較為理想。各種填充方法有什么區(qū)別？

　　答：填充方法一般有4種

　?、俑邏簞驖{法，多用于分析柱和小規(guī)模制備柱的填充；

　?、趶较蚣訅悍?；

　　③軸向加壓法，主要用于裝填大直徑柱；

　?、芨煞?。柱填充的技術(shù)性很強(qiáng)，大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室使用已填充好的商品柱。為什么以20um為分界點(diǎn)？填料方法的前三種都是濕法嗎，能不能對四種填充方法做一個(gè)簡短的說明？

　　14、想請您具體說明一下反沖色譜柱的方法，是不連檢測器嗎？

　　答：反沖就是將柱子反向連到系統(tǒng)中。因?yàn)橛形廴疚锓礇_出來，當(dāng)然不連檢測器，出液端直接接到廢液瓶就可以。

　　15、網(wǎng)上對柱子是否可以反沖一直有爭論，那什么樣的柱子可以反沖，什么不可以。反沖后是正者用，還是反著用。具體到各型號柱子不僅是ODS柱，其他如正向柱、氨基柱、離子交換柱等最好都有解釋。

　　答：一般的正相反相柱應(yīng)該都能反沖，只有兩端篩板孔徑不對稱的柱子不能反沖，不過目前這樣的柱子已經(jīng)比較少見了。反沖是為了把柱頭的污染物沖洗掉，反沖后還是正著用比較好，以免柱子的兩頭都被污染。我們一直提倡的是：正向使用，反向沖洗。

　　16、在做方法開發(fā)的時(shí)候,用乙腈和水作為流動(dòng)相,在調(diào)整梯度的時(shí)候發(fā)現(xiàn)，剛開始用60%乙腈，RT為2.5分鐘，調(diào)到40%乙腈，RT沒有變化，30%也沒有變化,一直調(diào)到20%的時(shí)候，RT突然變到了約13分鐘，請問這是什么原因？我用的是離子交換柱。

　　答：離子交換柱的保留時(shí)間主要由洗脫液的離子強(qiáng)度和pH決定，你現(xiàn)在講的比較簡單，需要把你的方法說的詳細(xì)一點(diǎn)才能做具體的分析。